司空見慣未必真了解:移液器的正確使用與日常維護(hù)
/// 移液器的正確使用與維護(hù),保證精確移液的日常操作!
1 移液器正確使用
01 量程調(diào)節(jié)
量程的設(shè)定原則:由大到??!
1)當(dāng)由小量程到大量程時:
2)朝所需量程方向連貫旋轉(zhuǎn)
3)旋轉(zhuǎn)到達(dá)超過所需量程1/3圈處
4)回調(diào)到所需量程處
Tips:正確的量程設(shè)定可以提高0.5%的移液準(zhǔn)確性!IKA移液器具有量程安全鎖,待調(diào)節(jié)到所需體積后,按下量程安全鎖,體積即被鎖定,在移液過程中可以有效防止量程“漂移"。
02 安裝吸頭
正確操作:
移液器套柄用力下壓并小幅度旋轉(zhuǎn)即可
錯誤操作:
用力敲擊吸頭。(此方法會帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損,從而影響其密封性)
Tips:規(guī)范的移液操作可能帶來0.1%到5%的移液誤差,甚至更高!
03 潤洗吸頭
用同一樣品對吸頭進(jìn)行潤洗
先吸取樣品,然后排回樣品池或廢液槽
潤洗有助于提高吸頭多次相同移液操作的一致性
注意:高溫或低溫液體不要潤洗吸頭!
Tips:潤洗吸頭可提高0.5%的移液準(zhǔn)確性!
04 吸液的正確操作
保持平順,控制好吸液速度
過快的吸液速度,會導(dǎo)致:
1)樣品液進(jìn)入套柄
2)對活塞和密封圈造成損傷
3)帶入氣霧
4)造成樣品交叉污染
Tips:不正確的吸液速度會導(dǎo)致至少5%的準(zhǔn)確性下降! IKA 移液器的機(jī)身重量很輕,適合于長時的移液操作。對于分相液體需要吸取特定層的樣品時,必須控制好手速,緩慢釋放移液軸,避免吸取到非特定層的物質(zhì)。
05 吸液的正確姿勢
正確的吸頭浸入角度
錯誤的吸頭浸入角度
Tips:以正確角度進(jìn)行吸液操作可提高0.5%的移液準(zhǔn)確性 (微量程移液器可達(dá) 2.5%)
06 排液
先將排液按鈕按至第一檔(排液檔),略作停頓以后,再按至第二檔(吹液檔)
常規(guī)排液操作:
1)沿容器內(nèi)壁排液(常規(guī))
2)直接排入液面下
3)在液面上方排液
Tips:正確的排液技術(shù)提高1%的移液準(zhǔn)確性!
07 高黏及易產(chǎn)生氣泡樣品的移液策略
反向移液技術(shù):
將排液按鈕按至第二檔
將吸頭浸入液面至少1mm,吸取液體
排出液體時,將排液按鈕按至第一檔
殘存在吸頭內(nèi)的液體可以排出到原瓶或者棄掉
2 移液器的日常維護(hù)
01 移液器歸位
當(dāng)天用完應(yīng)調(diào)回最大量程,放置于移液器支架或?qū)嶒炁_掛鉤上。
02 移液器的清潔
A. 外部清潔
移液器外殼清潔,可先用日常清潔劑(肥皂液,洗潔精等)擦洗,然后用雙蒸水擦凈晾干即可。
B. 內(nèi)部清潔
移液器內(nèi)部清潔,先將移液器下半部分拆卸下來,其中塑料部件采用與外部清潔一致的方式即可;活塞清潔可用雙蒸水(或先用異丙醇沖洗再用雙蒸水洗凈),晾干即可(需要涂密封油脂的移液器還需要涂上密封油脂)。
Tips:移液器槍體密封部分,大多是免維護(hù)的,不能輕易拆卸。
03 移液器的消毒滅菌
A. 常規(guī)的高溫高壓滅菌處理
用滅菌袋或牛皮紙等材料包裝移液器滅菌部件,121°C,1BAR,20分鐘,滅菌完畢室溫下*晾干后再組裝。
B. UV紫外照射進(jìn)行表面滅菌消毒
Tips:IKA的移液器允許整支消毒滅菌。實驗者也可徒手拆卸開移液器的下半部分進(jìn)行部分消毒滅菌的處理。
04 移液器的氣密性檢查
絕大部分移液器不準(zhǔn)是由于移液器漏氣造成,造成移液器漏氣的原因很多,像吸頭質(zhì)量、吸頭匹配性、吸頭安裝是否緊密、移液器本身漏氣等。當(dāng)懷疑移液器本身漏氣時,可通過以下方法進(jìn)行檢查:
A. 簡單目視檢測法(適合用戶自行檢測)
取一個透明的容器,裝上水,將需要測試的移液器裝上吸頭,吸上水。
如果是200ul以下的移液器,請將吸頭浸入液面1-2毫米,靜待20秒,觀察吸頭內(nèi)部液面是否下降,如果下降了,就說明您手中的移液器出現(xiàn)了漏氣的情況;
如果是1000ul以上的移液器,請將吸頭朝下懸垂20秒,觀察是否有液體下滴,如果有,說明您手中的移液器也出現(xiàn)了漏氣的情況
Tips:如移液器本身密封性不好,需更換活塞或密封圈。
B. 專業(yè)壓力泵檢測
需使用專業(yè)壓力泵進(jìn)行檢測。
05 移液器校準(zhǔn)
需要在特定的環(huán)境條件(溫度、濕度等)及具備相應(yīng)硬件(如高精密度的天平)的實驗室中進(jìn)行,客戶一般只能粗略進(jìn)行自測(IKA的移液器上有一個校調(diào)按鈕,若發(fā)現(xiàn)量程不準(zhǔn),可人工按下此按鈕,進(jìn)行移液器校調(diào))。需嚴(yán)格校準(zhǔn)則需由廠家進(jìn)行校準(zhǔn)。
Tips:IKA 可為購買IKA移液器的客戶提供校準(zhǔn)服務(wù)(收費項目),出具符合CNAS要求的校準(zhǔn)報告。